TOYOPEARL HW 和 TSKgel PW 型尺寸排阻樹脂是所有東曹公司離子交換、疏水作用和親合層析填料產(chǎn)品的基質(zhì)。在初步聚合反應(yīng)產(chǎn)生特定的填料粒徑和孔徑后，通過化學(xué)修飾改變樹脂表面特征以獲得特定的產(chǎn)品。TOYOPEARL HW產(chǎn)品屬于羥基化的聚甲基丙烯酸類樹脂。通過化學(xué)手段，獲得不同粒徑（30μm或以上）和孔徑大小的TOYOPEARL HW型尺寸排阻填料。它們與TSKgel PW填料相比，交聯(lián)度更低。低交聯(lián)使得在生產(chǎn)以TOYOPEARL HW為基質(zhì)的離子交換和疏水填料時，能夠提供更多的配體固定化反應(yīng)或修飾位點。因此，與相應(yīng)的TSKgel PW 基質(zhì)相比，修飾后的TOYOPEARL HW 樹脂填料具有更高的動態(tài)吸附載量。HW 和 PW 樹脂填料由于具有同樣的基質(zhì)骨架，相同類型官能團(tuán)的填料對于蛋白質(zhì)或雜質(zhì)的保留具有相似的選擇性。 TOYOPEARL HW 樹脂填料，可以在高線性流速下使用，且能承受高達(dá)3bar的工作壓力。
Toyopearl | 分子量排阻范圍 | Sephadex | |
右旋糖酐 | 蛋白 | ||
HW-40 | 100-7000 | 100-10000 | LH-20，G-25 |
HW-50 | 500-20000 | 500-80000 | G-75，G-100，G-150 |
HW-55 | 1000-200000 | 1000-700000 | G-100，G-200 |
HW-65 | 10000-1000000 | 50000-1000000 | 6B,4B |
HW-75 | 100000-10000000 | 500000-50000000 | 4B,2B |
填料粒徑?? S級：20-40μm
?????????? F級：30-50μm
?????????? C級：50-100μm
?????????? EC級：100-300μm（只針對HW-40提供EC級粒徑的填料）
與糖相比，由于蛋白結(jié)構(gòu)緊湊，因此同類分子篩填料對糖和蛋白的排阻界限有所差別。Toyopearl填料的骨架為含羥基的親水性聚甲基丙烯酸樹脂，由于不含糖基，與多糖類填料相比，不會和糖類樣品發(fā)生非特異性相互作用。
使用HW填料對各種糖類進(jìn)行分析的應(yīng)用匯總表
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化合物 | Toyopearl填料 | 備注 |
酸性環(huán)糊精/Acidic cyclodextrin | SP-650C,HW-40F | * |
酸性寡糖/Acidic oligosaccharide | DEAE-650M | 1-100 mM KCl梯度 |
抗肝炎多糖/Anti-hepatitis ? polysaccharide | DEAE-650C | * |
支鏈低聚果糖/Branched ? fructooligosaccharide | HW-40S | * |
致癌物抑制劑/Carcinogen promoting ? inhibitor | HW-65F | * |
性腺A/Gonaderan A | DEAE-650 | * |
紫草多糖/Lithosperman A | DEAE-650 | * |
麥芽戊糖苷/Maltopentoside | HW-40S | 流動相：水 |
多糖/Polysaccharide | HW-65F | 0.1 ? ?M NaCl |
淀粉/Starch | HW-75F | |
TX-1多糖/TX-1 ? polysaccharide | HW-65F | * |
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低分子生物活性物質(zhì)的分離
化合物 | Toyopearl填料 | 備注 |
Acakyphidins | HW-40 | |
花青素/Anthocyanin | HW-40F | |
蒽醌/Anthraquinone | DEAE-650C | * |
Black vinegor | HW-50F | 流動相：水 |
兒茶酚/Catechin | HW-40 |
栗癭鞣質(zhì)/Chestanin | HW-40F | 流動相：50%的甲醇 |
地高辛/Digoxin | HW-40F | 流動相：50%的甲醇 |
Epigarocatechin | HW-40 | |
黃烷/Flavan | HW-40C | |
類黃酮配糖類/Flavonoid glycoside | HW-40 | |
沒食子酰熊果酚苷/Galloylarbutin | HW-40F | |
異黃酮/Isoflavonoid | HW-40 | 流動相：甲醇/水=70/30 |
哇巴因/Ouabain | HW-40F | 流動相：50%的甲醇 |
植物生長激素/Plant growth hormone | HW-40 | |
多酚/Polyphenol | HW-40C, ? HW-40EC | |
花色素低聚物/Proanthocyndin oligomer | HW-40F | * |
原花青素/Procyanidine | HW-40S,HW-40F | |
丹寧酸/Tannin | HW-40 | |
茶黃素/Theaflavin | HW-40 | * |
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結(jié)論：
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Toyopearl HW-40 系列填料具有很多的優(yōu)勢：
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1. 優(yōu)異的剛性強度和化學(xué)穩(wěn)定性
?? * 可以放大至更大的制備規(guī)模和獲得更高的流速（適用于超過200L的層析制備柱）
?? * 適用于強堿溶液
2. 4種不同的粒徑可供選擇
?? * S級（30μm）、F級（45μm）、C級（100μm）和EC級（200μm）
?? * 高分辨率、高流速。
3. 適用于水和各種有機溶劑
?? * 甲醇、乙腈、丙酮、四氫呋喃等等
?? * 根據(jù)樣品的溶解性來選擇合適的有機溶劑（流動相）
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Toyopearl 填料使用上的注意點：
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1.???? 裝填前的勻漿準(zhǔn)備
Toyopearl系列產(chǎn)品出貨時保存在20%的乙醇中（乙醇/水=20/80）。需要注意的是，如果需要在氯仿、四氫呋喃、乙酸乙酯等非極性溶劑中使用時，需要進(jìn)行逐步置換，而不能進(jìn)行互不相溶的溶液間的直接替換。
2???? 填料的裝填
Toyopearl填料的剛性強度好，相比瓊脂糖、葡聚糖基質(zhì)的軟膠來講，更適宜在高流速下進(jìn)行裝填以便獲得更高柱效、更高分辨率的層析柱。
