硅膠表面進(jìn)行修飾后具有獨(dú)特的吸附性，同時(shí)，硅膠表面鍵入羥基的技術(shù)已經(jīng)成熟。Diolsilica 這種類型的硅膠過(guò)去并沒(méi)有得到普遍應(yīng)用，主要是由于其具有普通硅膠所不具備的獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。日本富士硅化學(xué)有限公司反復(fù)評(píng)估 Diol silica 產(chǎn)品的反應(yīng)過(guò)程、作用及特性，證實(shí)此產(chǎn)品在正相層析時(shí)具有普通硅膠所不具備的獨(dú)特性質(zhì)。到目前為止，Diol 硅膠填料已出售，并用于較難復(fù)合物的分離。

問(wèn)：選擇何種 HILIC 色譜柱型號(hào)開(kāi)始實(shí)驗(yàn)？

答：內(nèi)徑 4.6mm 的色譜柱適合流速為 0.5-3ml/min 的分析，而內(nèi)徑 2.1mm 的色譜柱更適合用于 HILIC-MS分析。色譜柱的長(zhǎng)度取決與具體的應(yīng)用。如不確定自己的需要，粒徑 5um，長(zhǎng)度 150mm(P/N2712-155)的色譜柱是不錯(cuò)的選擇。快速簡(jiǎn)單樣品的分離可以選擇短柱分析(如 50mm， P/N2712-055)的色譜柱，而更復(fù)雜的分離需選擇更長(zhǎng)些的柱子 (如 250mm，P/N2712-255)。

問(wèn)：內(nèi)徑為 4.6mm，2.1mm 或 1.0mmZIC-HILIC 色譜柱的推薦流速為多少？

答：對(duì)于內(nèi)徑為 4.6mm，2.1mm 和 1.0mm 所有規(guī)格的色譜柱而言，推薦使用的流速分別為 0.5ml/min，.1ml/min，或 0.02ml/min，或比推薦流速稍大、稍小些。舉例來(lái)說(shuō)，2.1mm 的色譜柱流速為 0.1ml/min時(shí)可達(dá)到最大效率。流速達(dá) 0.5ml/min 時(shí)，分離效率下降為最大效率的 20%，如果分辨率能達(dá)到要求，它可以節(jié)省時(shí)間。這個(gè)規(guī)律也適合于其他內(nèi)徑的 HILIC 色譜柱。

問(wèn)：ZIC-HILIC 色譜柱帶什么功能團(tuán)？

答： 被稱為”硫代甜菜堿”官能團(tuán)。?

問(wèn)：HILIC 分離中孔徑的作用？通過(guò) ZIC-HILIC 色譜柱從小分子化合物中分離丙氨酸，使用粒徑 3.5um，柱尺寸為 150×2.1mm 的分析柱，20×2.1 的保護(hù)柱，對(duì)于這個(gè)應(yīng)用，選擇孔徑 100A 還是 200A 的色譜柱，那款更適合一些？

答：在這個(gè)應(yīng)用中，這類產(chǎn)品都會(huì)起作用，但是我們推薦粒徑 3.5um，孔徑 200A (p/n 2702-152)的色譜柱，小孔徑提供更高的容量因子。

問(wèn)：我們使用 ZIC-HILIC 與 ICP-MS 相連，但是關(guān)心流動(dòng)相中有機(jī)相的含量，與乙腈有什么不同？

答：通過(guò)使用二氧六環(huán)或者其他的，或更高沸點(diǎn)的溶劑可以減少碳消耗的問(wèn)題，但是最終取決與樣品和應(yīng)用的本質(zhì)。

問(wèn)：ZIC-HILIC 和硅膠 HILIC 色譜柱有什么區(qū)別？

答：ZIC-HILIC 色譜柱裝填的是鍵合有兩性離子官能團(tuán)的固定相，而硅膠 HILIC 色譜柱是純硅膠。

ZIC-HILIC 色譜柱固定相創(chuàng)建了一個(gè)穩(wěn)定的水層，把水穩(wěn)固在固定相表面。這使得等度和梯度模式下色譜柱更穩(wěn)定。也允許進(jìn)樣水樣(如果不是使用太大的體積)。該色譜柱也有很好的使用壽命。硅膠 HILIC 色譜柱有著連續(xù)色譜相關(guān)的一些問(wèn)題，如：吸附因素，對(duì)某些化合物峰拓寬，平衡慢。此外，它對(duì)改變流動(dòng)相中水的比例也十分敏感，由于其動(dòng)力學(xué)慢使其很難進(jìn)行梯度洗脫。據(jù)報(bào)道，純硅膠色譜柱使用壽命也短些。

問(wèn)：對(duì) ZIC-HILIC 色譜柱和硅膠 HILIC 色譜柱而言，有效的 PH 范圍是多少？

答：ZIC-HLIC 色譜柱帶有帶電的兩性離子官能團(tuán)，但其整體而言表現(xiàn)中性親水型。由于流動(dòng)相的 pH 用于中度離解和樣品的保留，其會(huì)產(chǎn)生獨(dú)一無(wú)二的選擇性。硅膠基材的 ZIC-HILIC 色譜柱可以使用的 pH 范圍是 2-8，聚合物基材的 ZIC-pHILIC 色譜柱可以使用的 pH 范圍為 2-10，相反，一個(gè)純硅膠色譜柱在 pH大于 4 時(shí)，其表現(xiàn)為陽(yáng)離子交換，硅膠表面會(huì)產(chǎn)生官能團(tuán)(-OH)，堿性化合物將結(jié)合的更強(qiáng)，需要更多的緩沖液洗脫，這對(duì) MS 是不利的。

問(wèn)：ZIC-HILIC 和 ZIC-pHILIC 色譜柱相關(guān)參數(shù)(PH 范圍、最大壓力、最大溫度、孔徑、表面積、碳含量)各是多少？

答：碳含量與 HILIC 色譜柱無(wú)關(guān)，而是反相柱參數(shù)。